Efficacy of the 7-chloro-4-(3-hydroxy-benzilidenehydrazo)quinoline derivative against infection caused by Leishmania amazonensis

Abstract INTRODUCTION: The drugs currently available for leishmaniasis treatment have major limitations. METHODS: In vitro and in vivo studies were performed to evaluate the effect of a quinoline derivative, Hydraqui (7-chloro-4-(3-hydroxy-benzilidenehydrazo)quinoline, against Leishmania amazonensis. In silico analyses of absorption, distribution, metabolism, excretion, and toxicity (ADMET) parameters were performed. RESULTS: Hydraqui showed significant in vitro anti-amastigote activity. Also, Hydraqui-treated mice exhibited high efficacy in lesion size (48.3%) and parasitic load (93.8%) reduction, did not cause hepatic and renal toxicity, and showed appropriate ADMET properties. CONCLUSIONS: Hydraqui presents a set of satisfactory criteria for its application as an antileishmanial agent.

EVIDENCE OF Leishmania (Leishmania) infantum INFECTION IN DOGS FROM JUIZ DE FORA, MINAS GERAIS STATE, BRAZIL, BASED ON IMMUNOCHROMATOGRAPHIC DUAL-PATH PLATFORM (DPP®) AND PCR ASSAYS / Evidência de infecção por Leishmania (Leishmania) infantum em cães de Juiz de Fora, Minas Gerais, Brasil, detectada pelo teste imunocromatográfico rápido DPP e PCR

In Brazil, domestic dogs are branded as the primary reservoir for zoonotic visceral leishmaniasis, due to the clear positive correlation observed between human and canine infection rates. This study aimed to carry out a serological survey of canine visceral leishmaniasis (CVL) in dogs housed at a public kennel in the municipality of Juiz de Fora, Minas Gerais State, Brazil, using the immunochromatographic TR DPP® CVL rapid test. Additionally, conventional and/or real time PCR assay was used to detect and confirm L. infantum infection in the DPP positive dogs only. Of the 400 dogs studied, most did not present clinical signs for CVL (p < 0.05), and fifteen (3.8%) were seropositive in the DPP test. There was no statistically significant difference between the DPP seropositive dogs and the clinical signs of the disease (p > 0.05). Both conventional and real time PCR tests confirmed L. infantum infection in nine (75.0%) of the twelve DPP seropositive dogs that remained alive during the follow-up period. This study is the first seroepidemiologic survey of CVL held in the city of Juiz de Fora, and the results reinforce the idea that this disease is currently in a process of expansion and urbanization in Brazil. Furthermore, this study highlights the use of the DPP test as an alternative for diagnosing CVL in large and mid-sized cities, due to its ease of implementation.

No Brasil, cães domésticos são considerados como os principais reservatórios da leishmaniose visceral zoonótica, devido à clara correlação positiva existente entre as curvas de infecção humana e canina. Este estudo objetivou a realização de um inquérito sorológico da leishmaniose visceral canina (LVC) em cães abrigados em um canil público de Juiz de Fora, Minas Gerais, Brasil, através do teste rápido imunocromatográfico TR DPP®. Adicionalmente, a PCR convencional e/ou em tempo real foi usada para detectar/confirmar a infecção por L. infantum apenas nos animais DPP positivos. Dos 400 cães estudados, a maioria não apresentou sinais clínicos para a LVC (p < 0,05) e quinze (3,8%) foram sororreativos ao DPP. Não houve diferença estatisticamente significativa entre os cães com DPP positivo e os sinais clínicos para a doença (p > 0,05). PCR convencional e em tempo real confirmaram a infecção por L. infantum em nove (75,0%) dos doze animais DPP positivos que permaneceram vivos durante o estudo. Este é o primeiro estudo soroepidemiológico sobre LVC realizado no município de Juiz de Fora, e os resultados reforçam a idéia de que esta doença está em processo de expansão e urbanização no Brasil. Além disto, este estudo destaca o uso do DPP como uma alternativa para o diagnóstico da LVC em cidades de médio e grande porte, devido à facilidade de execução.

Polymerase chain reaction for the evaluation of Schistosoma mansoni infection in two low endemicity areas of Minas Gerais, Brazil

This study aimed to evaluate the occurrence of schistosomiasis in areas with low endemicity using polymerase chain reaction (PCR) as a diagnostic method. We analysed faecal samples from 219 individuals residing in Piau and Coronel Pacheco, state of Minas Gerais, Brazil, using a single faecal sample from each individual and two slides of the Kato-Katz technique as a gold standard. Fifteen out of the 219 samples were positive with both methods of diagnosis. One sample was diagnosed as positive by the Kato-Katz technique only and 61 were diagnosed only by PCR. The positivity rates were 7.3% with the Kato-Katz method and 34.7% with PCR. When both techniques were assumed to have 100% specificity and positive individuals were identified by both methods, the sensitivity of the Kato-Katz method was 20.8% and the PCR sensitivity was 98.7%. The Kappa index between the two techniques was 0.234, suggesting weak agreement. The assessment of a single faecal sample by PCR detected more cases of infection than the analysis of one sample with two slides using the Kato-Katz technique, suggesting that PCR can be a useful diagnostic tool, particularly in areas with low endemicity.

Ensaio clínico randomizado controlado duplo-cego da nitazoxanida no tratamento do poliparasitismo intestinal / Randomized double blind controlled trial of nitazoxanide in human intestinal polyparasitism: a brazilian study

Foi realizado um ensaio clínico controlado, duplo cego, randomizado, para avaliar a efetividade e efeitos adversos associados à nitazoxanida, em comparação a outras drogas antiparasitárias (albendazol, tiabendazol, praziquantel e secnidazol), no tratamento de indivíduos poliparasitados. Foram avaliados 65 indivíduos nos dois grupos de tratamento. Os desfechos primários foram: cura ou ausência de cura; diminuição ou não da carga parasitária; ocorrência ou não de eventos adversos. A taxa de cura foi de 32,4% e 38,7% com a nitazoxanida e com o tratamento convencional, respectivamente, mas esta diferença não foi estatisticamente significativa (p=0,559). Dos efeitos adversos analisados, houve diferença significativa entre os grupos apenas para vômitos (p=0,031, no grupo que recebeu as drogas convencionais) e urina esverdeada (p=0,002, no grupo que recebeu a nitazoxanida). São necessários outros estudos para esclarecer a baixa efetividade nos casos de poliparasitismo, assim como reavaliar as práticas preventivas e terapêuticas, com o uso de novas drogas e de agentes de largo espectro, podendo a nitazoxanida ser uma droga alternativa neste contexto.

Malacological survey of Biomphalaria snails in municipalities along the Estrada Real in the southeast of the State of Minas Gerais, Brazil / Pesquisa malacológica de Biomphalaria em municípios da Estrada Real, situados no sudeste do Estado de Minas Gerais

INTRODUCTION: The increasing practice of ecotourism and rural tourism in the State of Minas Gerais, Brazil, highlights the importance of studies concerning the occurrence of potential intermediate hosts of Schistosoma mansoni. This study aimed to identify species of Biomphalaria snails in municipalities along the Estrada Real, an important Brazilian tourism project. METHODS: The specimens were collected in different water collections of 36 municipalities along the Estrada Real in the southeast of the State of Minas Gerais. Biomphalaria species were characterized using both morphological and molecular approaches. The research was conducted between August 2005 and September 2009 and all the sites visited were georeferenced using GPS. RESULTS: Six Biomphalaria species were found in 30 of the 36 municipalities studied: glabrata, tenagophila, straminea, peregrina, occidentalis and schrammi. The first three species of Biomphalaria, recognized as intermediate hosts of S. mansoni, were present in 33.3 percent, 47.2 percent and 8.3 percent of the municipalities studied, respectively. The mollusks were found in different types of water collections and no infection by S. mansoni was detected. The highest occurrence of Biomphalaria concentration was verified in the area covered by the Caminho Novo route (Diamantina/MG to Rio de Janeiro/RJ). CONCLUSIONS: Considering the occurrence of schistosomiasis in the State of Minas Gerais and the socioeconomic repercussions involved in the Estrada Real Project, this work focuses on the vulnerability of water collections due to the presence of Biomphalaria mollusks and emphasizes the need for epidemiological surveillance and sanitary and educational measures integrated with the local community and tourism sectors.

INTRODUÇÃO: O aumento das práticas de ecoturismo e turismo rural, em Minas Gerais, Brasil, evidencia a importância de se realizarem estudos sobre a ocorrência de hospedeiros intermediários do Schistosoma mansoni, no estado. O presente trabalho objetivou a busca e identificação das espécies de caramujos Biomphalaria encontrados em municípios mineiros pertencentes à Estrada Real, um importante projeto de turismo brasileiro. MÉTODOS: Os moluscos foram coletados em 36 municípios da Estrada Real, no sudeste de Minas Gerais. A pesquisa foi realizada de agosto de 2005 a setembro de 2009 e todos os locais visitados foram georreferenciados com o uso de GPS. RESULTADOS: Dos 36 municípios estudados, 30 apresentaram a ocorrência de pelo menos uma entre as seis espécies de Biomphalaria: glabrata, tenagophila, straminea, peregrina, occidentalis e schrammi. As três primeiras espécies citadas, reconhecidas como hospedeiras intermediárias do S. mansoni, estavam presentes em 33,3 por cento, 47,2 por cento e 8,3 por cento dos municípios estudados, respectivamente. Os moluscos foram encontrados em diferentes tipos de coleções hídricas e em nenhum deles foi detectada infecção pelo S. mansoni. Houve maior ocorrência de Biomphalaria na área referente ao Caminho Novo (Diamantina/MG ao Rio de Janeiro/RJ). CONCLUSÕES: Considerando-se a ocorrência da esquistossomose, no Estado de Minas Gerais, e as repercussões socioeconômicas que envolvem o projeto Estrada Real, este trabalho aponta para a vulnerabilidade das coleções hídricas devido à presença de moluscos Biomphalaria e enfatiza a necessidade de vigilância epidemiológica e medidas educativas e sanitárias integradas com a comunidade local e setores de turismo.

Validação do número de lâminas para realização do método de sedimentação espontânea das fezes / Validation of the number of slides for accomplishment of the faecal spontaneous sedimentation method

Este estudo avaliou o número satisfatório de lâminas a serem examinadas pela técnica de sedimentação espontânea das fezes ou de Hoffmann, Pons e Janer (HPJ), com o intuito de contribuir para a eficiência no diagnóstico de exames coproparasitológicos no diagnóstico de parasitoses, objetivando menor custo e maior benefício. A partir de um estudo da prevalência de enteroparasitoses, cujo cálculo amostral aleatório teve como base toda a população residente no município de Piau -Minas Gerais, foram investigadas 925 amostras. O número máximo de lâminas examinadas para cada amostra de fezes foi de cinco, considerado como padrão-ouro. Cada lâmina foi avaliada por cinco examinadores diferentes. Na análise de apenas uma lâmina, a frequência de positividade para enteroparasitos foi inferior a 60% e aumentou para 79,7% na análise de uma segunda lâmina. Na observação da terceira e quarta lâminas, a positividade das amostras foi 87,5% e 95,3%, respectivamente. Verificou-se que a sensibilidade e especificidade aumentaram com o número de lâminas examinadas e que na observação de três lâminas por amostra, a sensibilidade foi de 87,5% e a especificidade de 99,1%. Entre os enteroparasitos, os ancilostomídeos e Giardia lamblia foram os mais prevalentes, representando 13,7% de positividade para ambos. A análise de apenas uma lâmina por amostra elevou o risco de resultado falso negativo. Os resultados encontrados sugerem a realização de três lâminas por amostra pela técnica do HPJ na tentativa de aumentar a acurácia do método diagnóstico com custos sustentáveis para a gestão junto ao Sistema Único de Saúde.

This work analyzed the optimal number of slides necessary in the spontaneous fecal sedimentation method, also known as the Hoffmann, Pons e Janer (HPJ) technique, with the objective of increasing efficiency and reducing cost of the diagnosis of parasitic infections using the stool test. In a study of the prevalence of intestinal parasite infection in a random sampling of the resident population of Piau, Minas Gerais, 925 samples were analyzed. The maximum number of slides analyzed for each fecal sample was five, considered as the gold standard. Each slide was evaluated by five different analysts. Upon examination of only one slide, the positive frequency for enteroparasites was less than 60.0% and increased to 79.7% when analyzing a second slide. After analysis of a third and fourth slide, the number of enteroparasite positive samples increased to 87.5% and 95.3%, respectively. It was verified that the sensitivity and specificity increased with the number of slides examined and, after observation of three slides per stool sample, the sensitivity was 87.5% and the specificity was 99.1%. Among the enteroparasites detected, the most prevalent were hookworms and Giardia lamblia, with a frequency of 13.7% for both. The analysis of only one slide per sample increased the risk of false negative result. The findings suggest that the examination of three slides per stool sample using the HPJ fecal spontaneous sedimentation technique is optimal in order to increase the efficiency of the fecal diagnostic method without substantially increasing costs for the public health care system.

Avaliação biométrica de Biomphalaria spp. (Preston,1910) no município de Juiz de Fora, MG / Biometric evaluation of Biomphalaria spp. (Preston,1910) in Juiz de Fora Municipality, Brazil

As dimensões corporais são medidas utilizadas para a identificação e caracterização dos indivíduos das mais variadas espécies e podem ser avaliadas em indivíduos parsitados ou não quanto às respostas somáticas específicas. Este estudo trata da avliação biométrica de 1.129 moluscos do gênero Biomphalaria, coletados no município de Juiz de Fora, Minas Gerais, no ano de 2004. Foram coletados: 360 espécimes de B. straminea e analisados 215; 255 espécimes de B. peregrina e analisados 196; 1.550 espécimes de B. tenagophila (espécie mais prevalente na região) e analisados 718. Os moluscos capturados foram secos, pesados e medidos vivos; os moluscos mortos foram desprezados. As variáveis peso e diâmetro foram avaliadas por espécie e de forma independente e correlacionada. Estatisticamente, os estudos das variáveis diâmetro e peso revelaram que as menores médias biométricas foram evidenciadas pela espécie B. peregrina, seguida por B. straminea. Todas as espécies apresentaram diâmetro máximo das conchas cerca de 50por cento mais baixo do que os maiores diâmetros descritos na literatura. Verificou-se forte correlação positiva entre as variáveis peso (massa corpórea) e diâmetro (tamanho da concha) nas três espécies de Biomphalaria analisadas, o que fornece sólida base para se estabelecer consistente correlação direta entre estes parâmetros.

Biomphalaria spp. (Preston, 1910) snails in the municipality of Juiz de Fora, Zona da Mata Mineira mesoregion, ate of Minas Gerais, Brazil

This study focuses on the geographic distribution of the snail of the genus Biomphalaria and evaluates its infectivity by Schistosoma mansoni in 5264 specimens collected in the municipality of Juiz de Fora, Minas Gerais, Brazil. Of the 31 locations studied, 6 were reservoirs, 11 rudimentary holding ponds, 7 irrigation ditches, 5 lakes, 1 ornamental pond, and 1 waterfall. Intermediate hosts were found only in the rudimentary ponds and ditches, which were 100 percent positive. Using morphological and molecular analysis techniques, B. tenagophila, B. peregrina, and B. straminea were identified. This is the first report of B. stramínea in the municipality, and evaluation of its infective potential revealed susceptibility of 25.4 percent. Although we did not find specimens of Biomphalaria infected by S. mansoni, the data obtained indicate the presence of intermediate hosts, especially in the irrigation ditches in Juiz de Fora, and their proximity to contaminated areas.

Pesquisa de contaminaçäo fecal em alfaces (Lactuca sativa) adquiridas em mercado da cidade de Juiz de Fora, Minas Gerais, Brasil / Research about fecal contamination of Lettuces (Lactuca sativa) which were got at the market of Juiz de Fora, MG, Brazil

Foi realizada, através de exames microbiológicos e parasitológicos, pesquisa sobre a contaminaçäo fecal em alfaces (Lactuca sativa) adquiridas em mercado da cidade de Juiz de Fora, MG, Brasil. Foram pesquisadas e encontradas bactérias Escherichia coli e larvas Strongyloides stercoralis, firmando a suposiçäo de contaminaçäo fecal e indicando as condiçöes sanitárias das hortaliças investigadas. Sugere-se às autoridades sanitárias um maior e efetivo controle da produçäo e comercializaçäo das hortaliças.